小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞提取物【Mouse Tubular：Normal TubularDerivatives】

小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞提取物是從小鼠原代腎小管平滑肌細(xì)胞提取的，小鼠原代腎小管平滑肌細(xì)胞從正常小鼠腎小管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

牛奶中金黃色葡萄球菌核酸檢測(cè)試劑盒（無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)）24T/48TNebivolol hydrochloride16929鹽酸奈必洛爾

牛奶中沙門氏菌核酸檢測(cè)試劑盒（無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)）24T/48TN-Demethylricinine216428

霍亂弧菌恒溫核酸檢測(cè)試劑盒24T/48Tn-Butyl-β-D-fructopyranoside678847

單核細(xì)胞增生李斯特菌恒溫核酸檢測(cè)試劑盒24T/48Tn-Butyl β-D-fructofuranoside971-正丁基-β-D-呋喃果糖苷

大腸埃希氏菌O157：H7恒溫核酸檢測(cè)試劑盒24T/48TN-Boc-O-Benzyl-D-serine4717N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸
Loxoprofen  中文名：洛索洛芬  分子式：C15H18O3    豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit  

Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O    豬可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit              

Loroglossin  中文名：  分子式：C34H46O18    豬雌激素(E)ELISA試劑盒  

Loratadine  中文名：氯雷他定  分子式：C22H23ClN2O2    豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒  

Loperamide hydrochloride  中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2    豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒
鹽酸阿米替林  HPLC≥98% 100mg MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA試劑盒小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去甲替林鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA試劑盒小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苯佐卡因  HPLC≥99% 100mg MouseSomatostatin,SSELISA試劑盒小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

飛燕草色素 HPLC≥98% 10mg MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISA試劑盒小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

矮牽牛色素   HPLC≥98% 5mg MouseSubstanceP,SPELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

芍藥素  HPLC≥98% 10mg MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錦葵色素  HPLC≥98% 10mg MouseSuperOxidaseDimase,SODELISA試劑盒小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)腺苷 HPLC≥98% 20mg Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISA試劑盒小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

安息香 HPLC≥99% 100mg MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISA試劑盒小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D綿子糖 HPLC≥98% 20mg MouseTestoterone,TELISA試劑盒小鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞提取物說(shuō)明書多酚氧化酶(PPO）測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

多巴胺   英文名稱：   Human Dopamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DPN  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  中文名：  分子式：C28H46O2  度：%

動(dòng)植物組織葡萄糖含量試劑盒   酶標(biāo)法    50管/48樣  4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one hydrochloride  中文名：  分子式：C14H18ClN3O4  度：98.0%

動(dòng)植物組織葡萄糖含量試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣              4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one hydrochloride  中文名：  分子式：C14H18ClN3O4 

動(dòng)物組織基因組提取試劑盒   Animal tissue genomic Exaction Kit  Periplocoside F  119902-17-9  中文名：  分子式：C63H104O23  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

 運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。