PrimaCell™人直腸平滑肌細胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA檢測試劑盒Duckviruseeritis,DEVELISAKit 96T/48T  98665-22-6靈芝酸G品牌  Ganoderic acid G 

犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Canine acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit  98296-48-1靈芝酸C2規(guī)格  Ganoderic acid C2 

英文名稱MouseAβ1-42proteinELISAKit小鼠Aβ1-42蛋白規(guī)格：96T/48T  108340-60-9靈芝酸D  Ganoderic acid D  

冰凍組織固著液50毫升  74285-86-2雷酚內酯說明書  Triptophenolide 

Ratferritin,FEELISA試劑盒大鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  74285-86-2雷酚內酯品牌  Triptophenolide
林澤蘭內酯B規(guī)格  Eupalinilide B   組織牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定性試劑盒20

苦玄參苷ⅠB說明書  Piefeltarraenin ⅠB   組織牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定量PCR擴增檢測試劑盒20

金色酰胺醇酯  Aurantiamide acetate   組織凝血酶/活化凝血因子II(THROMBIN/FACTORIIa)活性熒光定量檢測試劑盒20

絞股藍皂苷XLIX規(guī)格  Gypenoside XLIX   組織凝血酶/活化凝血因子II(THROMBIN/FACTORIIa)活性比色法定量檢測試劑盒20

甲基麥冬黃酮B說明書  Methylophiopogonone B    組織檸檬酸合成酶活性比色法定量檢測試劑盒20
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA試劑盒小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  36948-76-2千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷  Oroxyloside

小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： Hp-IgG ELISA Kit  114482-86-9木蝴蝶苷B說明書  Oroxin B

小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒MousePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 96T/48T  木蝴蝶苷A品牌  Oroxin A

人結核菌素(Tuberculin)試劑盒 Human Tuberculin ELISA Kit  絞股藍皂苷XLIX規(guī)格  Gypenoside XLIX

Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit大鼠抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  去芹菜糖桔梗皂苷D  Deapio platycodin D
PrimaCell™人直腸平滑肌細胞試劑盒價格113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌  Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside   英文名稱RatDesminELISAKit大鼠結蛋白(Desmin)規(guī)格：96T/48T

113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌  Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside   英文名稱RatCytochromoP450ELISAKIT大鼠細胞色素P450規(guī)格：96T/48T

113146-74-0酸漿苦味素L規(guī)格  Physalin L  英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1126032-65-2異-羅漢果皂苷V品牌  isomogroside V   英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1124-11-4川芎嗪  Chuanxiongzine   英文名稱RatCystatinCELISAKit大鼠胱抑素C(CysC)規(guī)格：96T/48T

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。