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PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒

PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒
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產(chǎn)品特點:
PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
  PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒的詳細資料:

PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 

產(chǎn)品名稱

PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒

英文名稱

 

貨號

EYX99496

 

 

實驗要點及說明;

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存;

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

操作要點;

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒 Canine hepatitis B virus surface aigen,HBsAg ELISA Kit  34981-26-5苦參酮說明書  Kurarinone 

英文名稱MouseBALPELISAKit小鼠BALP規(guī)格:96T/48T  靈芝酸E品牌  Ganoderic acid E 

冰凍切片組織組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20  靈芝酸C6規(guī)格  Ganoderic acid C6 

RatFcoagulationfactor,FELISA試劑盒RatFcoagulationfactor,FELISA試劑盒大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  100665-41-6靈芝烯酸B  Ganoderenic acid B 

小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP3 ELISA Kit  100665-43-8靈芝烯酸D說明書  Ganoderenic acid D
麥冬皂苷O-4規(guī)格  glycoside O-4   組織蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒20

靈芝酸E品牌  Ganoderic acid E    組織牛病毒性腹瀉病毒I(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性試劑盒20

靈芝酸C6規(guī)格  Ganoderic acid C6    組織牛病毒性腹瀉病毒I(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴增檢測試劑盒20

林澤蘭內(nèi)酯D說明書  Eupalinilide D   組織牛病毒性腹瀉病毒II(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定性試劑盒20

林澤蘭內(nèi)酯C品牌  Eupalinilide C   組織牛病毒性腹瀉病毒II(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定量PCR擴增檢測試劑盒20
MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  33889-69-9水飛薊汀  Silicristin

小鼠原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)ELISA試劑盒 ,英文名: Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 ELISA Kit  29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin

小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T  72581-71-6異水飛薊賓品牌  Isosilybin

人谷氨酸[NMDA]受體亞基ε-2(-2)抗體試劑盒 Human -2 Aibody ELISA Kit  510-30-5刺囊酸規(guī)格  Echinocystic acid

RatGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17086-76-9杯莧甾酮  Cyasterone
PrimaCell™人支氣管平滑肌細胞試劑盒112246-15-8(R)人參皂苷Rh2品牌  RGinsenoside Rh2   英文名稱RatCystatinCELISAKit大鼠胱抑素C(CysC)規(guī)格:96T/48T

1111088-89-114α-羥基SprengerininC  14α-hydroxy Sprengerinin C   英文名稱RatCyclosporinAELISAKit大鼠環(huán)胞霉素A(CSA)規(guī)格:96T/48T

11088-09-8CAS號:11088-09-8品牌  wilforine  英文名稱RatCyclosporinAELISAKit大鼠環(huán)胞霉素A(CSA)規(guī)格:96T/48T

1108-68-5華蟾毒它靈說明書  Cinobufotalin   英文名稱RatCyclinD3ELISAKit大鼠細胞周期素D3(CyclinD3)規(guī)格:96T/48T

110642-44-9朝藿定C  Epimedin C   英文名稱RatCyclinD3ELISAKit大鼠細胞周期素D3(CyclinD3)規(guī)格:96T/48T

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 人支氣管平滑肌 細胞試劑盒
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