人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Human Coronary Artery: Normal Aortic Endothelial cells Derivatives】

人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從人原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的，人原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮組織制備。正常人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

志賀氏菌單重凝膠PCR檢測(cè)試劑盒48Baclofen11347巴氯芬

單增李斯特氏菌單重凝膠PCR檢測(cè)試劑盒481-(4-(3-Chloropropoxy)-methoxyphenyl)ethanone5811

金黃色葡萄球菌單重凝膠PCR檢測(cè)試劑盒48Nifuroxazide9652硝呋酚酰肼

Nared 核酸染料0ulPrasugrel13223普拉格雷

Agencourt AMPure XP 磁珠5mlFexofenadine hydrochloride15343鹽酸非索非那定
Pefloxacin mesylate  70458-95-6  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S    兔白介素6(IL-6)ELISA試劑盒  

Ethopabate  1959/6/3  中文名：乙氧酰胺苯甲酯  分子式：C12H15NO4    兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒  

Nicarbazin  330-95-0  中文名：尼卡巴嗪  分子式：C19H18N6O6    兔白介素1（IL-1）ELISA試劑盒  

Ketoprofen  22071-15-4  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3    兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒           

Phenformin hydrochloride  834-28-6  中文名：鹽酸苯乙雙胍  分子式：C10H16ClN5    兔白介素-1a(rabbit IL-1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))  Lauric acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC) 人3-葡萄糖苷酸孕二醇(PdG)試劑盒 Human Pregnanediol-3-glucuronide,PdG ELISA kit

神經(jīng)酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))  Nervonic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) 人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)試劑盒 human 3-hydroxy-3-methylglaryl-Coenzyme A syhase 1,HMGCS1 ELISA Kit

十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))  Pentadecanoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 人3-硝基酪氨酸(3-)試劑盒 Human 3-niotyrosine,3- ELISA Kit

泛酸鈣一水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)  (+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人3型1-0酸鞘氨醇受體(S1P3)試劑盒 Human S1P3 ELISA Kit

山梨酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Potassium sorbate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人3氧代5α類(lèi)4脫氫酶2(SRD5A2)試劑盒 Human SRD5A2 ELISA Kit

全氟辛酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析)  Pentadecafluorooctanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析 人40S核糖體蛋白S19(RPS19)試劑盒 Human RPS19 ELISA Kit

正辛酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9%(GC))  n-Octanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9%(GC) 人4-羥基壬烯酸(HNE)試劑盒 Human 4-Hydroxynonenal,HNE ELISA Kit

蓖麻油酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)  Ricinoleic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 人5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基(PRKAA2)試劑盒 Human PRKAA2 ELISA Kit

硬脂酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))  Stearic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 人5核苷酸酶(5-)ELISA檢測(cè)試劑盒Human5-Nucleotidase,5-ELISAKit 96T/48T

甜蜜素(標(biāo)準(zhǔn)品)   Cyclamate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人5核苷酸酶(5-)試劑盒 Human 5-Nucleotidase,5- ELISA Kit
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物價(jià)格Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  289056-24-2  中文名：  分子式：C29H50O3  度：93.0%  關(guān)鍵詞：  云南崖摩; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒   小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、小鼠增殖細(xì)胞核抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Stigmast-4-ene-3β,6β-diol  113626-76-9  中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇  分子式：C29H50O2  度：93.0%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠合成酶(NOS)ELISAKit  

Stigmast-4-ene-3,6-dione  23670-94-2  中文名：豆甾-4-烯-3,6-二酮  分子式：C29H46O2  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  抗炎; 抗過(guò)敏; 藍(lán)薊; 小麥; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit  

Stellasterol  2465/11/4  中文名：星魚(yú)甾醇  分子式：C28H46O  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  麥角甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit  

Stavudine  3056-17-5  中文名：司他夫定  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠組胺(HIS)ELISAKit