產品名稱 | 人腎上皮細胞提取物培養 | 英文名稱 | Human Kidney : Normal Kidney Epithelial Cell Derivatives | 貨號 | EYX99013 |
人腎上皮細胞提取物【Human Kidney : Normal Kidney Epithelial Cell Derivatives】 人腎上皮細胞提取物是從人腎上皮細胞提取的,人腎上皮細胞從正常人腎組織制備。正常人腎組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 致病性蠟樣芽孢桿菌雙重實時熒光PCR檢測試劑盒TTorososide A1656892 五種致瀉性大腸埃希氏菌多重實時熒光PCR檢測試劑盒(A版本)TTopiramate9729托吡酯 五種致瀉性大腸埃希氏菌多重實時熒光PCR檢測試劑盒(B版本)TTolvaptan168托伐普坦 副溶血性弧菌/tdh/trh毒力基因三重實時熒光PCR檢測試劑盒TToltrazuril6043托曲珠利 副溶血性弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TTolazoline hydrochloride597鹽酸妥拉唑林 Pemetrexed 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C20H21N5O6 度:98.0% 小鼠白介素2(IL-2)ELISAKit 4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester 中文名: 分子式:C16H16N4O3 度:98.0% 小鼠白介素4(IL-4)ELISAKit Pemetrexed di 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C21H23N5Na2O6 度:98.0% 小鼠17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate 中文名: 分子式:C12H14N2O4S 度:98.0% 小鼠17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 度:98.0% 小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑) Bentonite 質量規格:Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑 犬透明質酸(HA)試劑盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑) Bentonite 質量規格:Bentone SD-2,適于中高極性溶劑 犬透明質酸酶1(HAase 1)試劑盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit 活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色) Activated charcoal 質量規格:AR,200目,粉末狀,褐色 犬透明質酸酶2(HAase 2)試劑盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit 活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色) Activated charcoal 質量規格:CP,200目,粉末狀,褐色 犬透明質酸酶3(HAase 3)試劑盒 Canine Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit 活性炭顆粒(AR,20-50目) Activated charcoal 質量規格:AR,20-50目 犬透明質酸酶4(HAase 4)試劑盒 Canine Hyaluronidase 4,HAase 4 ELISA Kit 活性炭(電鍍脫色,200目,from wood) Activated charcoal 質量規格:電鍍脫色,200目,from wood 犬維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T 活性炭(催化劑載體,8-16目) Activated charcoal 質量規格:催化劑載體,8-16目 犬維生素A(VA)試劑盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit 活性炭(凈水、氣體化,棒,φ1.0mm) Activated charcoal 質量規格:凈水、氣體化,棒,φ1.0mm 犬維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T 活性炭(凈水、氣體化,10-24目) Activated charcoal 質量規格:凈水、氣體化,10-24目 犬維生素E(VE)試劑盒 Canine Vitamin E,VE ELISA Kit 活性炭(電鍍脫色,40-60目,from Nutshell) Activated charcoal 質量規格:電鍍脫色,40-60目,from Nutshell 犬維生素K1(VK1)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T 人腎上皮細胞提取物培養Stavudine 3056-17-5 中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4 HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit 人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Albendazole 54965-21-8 中文名:阿苯達唑 分子式:C12H15N3O2S Humancytokeratin20,CK-20ELISA試劑盒人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒規格:96T/48T Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 175291-56-2 中文名:Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯 分子式:C26H26NO8P 組織HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性檢測試劑盒20次 8-Phenyloctanol 10472-97-6 中文名:8-苯基辛醇 分子式:C14H22O HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 8-Phenyloctanoic acid 26547-51-3 中文名:8-苯基辛酸 分子式:C14H20O2 兔子脂聯素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |