人牙周膜組織提取物【Human Periodontal Ligament: Normal Periodontal Ligament Derivatives】

牙周病是口腔常見疾病,在世界范圍內均有較高患病率。牙周組織健康被世界衛生組織列為衡量人類健康的十項標準之一[1]。人牙周膜組織的主體細胞為成纖維細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人牙周膜組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

Peptone 蛋白胨   2g /0g Doxifluridine94/9/5

Percoll 細胞分離液   0ml Tofacitinib 57379枸櫞酸托法替尼

PGA 3-磷酸甘油酸鈉鹽   25mg Fosaprepitant dimeglumine2651214

Phenol Red 酚紅   5gPazopanib4447312帕唑帕尼

Phytagel植物凝膠   0g /2gCapecitabine',3'-cyclic carbonate9217695卡培他濱
Dorzolomide hydrochloride  130693-82-2  中文名：鹽酸多佐胺  分子式：C10H17ClN2O4S3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠甘油三酯脂肪酶   英文名稱：   Mouse iglyceride Lipase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TGL

Donepezil hydrochloride  120011-70-3  中文名：鹽酸多奈哌齊  分子式：C24H30ClNO3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠甘油三酯   英文名稱：   Mouse iglyceride   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TG

Domperidone  57808-66-9  中文名：多潘立酮  分子式：C22H24ClN5O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠狀腺原酸   英文名稱：   T3 Mouse iiodothyronine   規格：   48T/96T   英文縮寫：   T3

Docosanoic acid  112-85-6  中文名：二十二烷酸  分子式：C22H44O2  度：%  關鍵詞：    小鼠狀腺原酸elisa試劑盒   小鼠狀腺原酸試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠狀腺原酸試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠狀腺原酸試劑盒、小鼠狀腺原酸elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Docetaxel  114977-28-5  中文名：多西他賽  分子式：C43H53NO14  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠硫氧還蛋白還原酶elisa試劑盒   小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒、小鼠硫氧還蛋白還原酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
曲安西龍（標準品）  Triamcinolone  質量規格：含量測定 小鼠膜聯蛋白A1(ANXA1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANXA1 ELISA Kit

舒林酸（標準品）  Sulindac  質量規格：檢查 小鼠膜聯蛋白A2(ANXA2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANXA2 ELISA Kit

HSP990  NVP-HSP990  質量規格：>98%,Hsp90抑制劑 小鼠膜聯蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒 ，英文名： ANXA5 ELISA Kit

鹽酸妥拉唑林（標準品）  Tolazoline HCl  質量規格：含量測定 小鼠膜鐵轉運蛋白(FPN)ELISA試劑盒 ，英文名： FPN ELISA Kit

鹽酸硫利達嗪（標準品）  Thioridazine hydrochloride  質量規格：鑒別 小鼠末端補體復合體C5b-9(C5b-9)ELISA試劑盒 ，英文名： C5b-9 ELISA Kit

鹽酸卡替洛爾（標準品）  2(1H)-QUINOLINONE  質量規格：鑒別 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 ，英文名： TCC C5b-9 ELISA Kit

二甲磺酸阿米三嗪（標準品）  Almitrine Bismesylate  質量規格：含量測定 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測試劑盒MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T

蘿巴新（標準品）  Raubasine  質量規格：含量測定 小鼠墨蝶呤還原酶(SPR)ELISA試劑盒 ，英文名： SPR ELISA Kit

卡莫氟(標準品)  Carmofur  質量規格：供HPLC法含量測定用 小鼠母系蛋白2(MATN2)ELISA試劑盒 ，英文名： MATN2 ELISA Kit

尼可占替諾（煙酸占替諾）標準品  Xanthinol nicotinate  質量規格：供HPLC法含量測定用 小鼠母系胚胎亮酸拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試劑盒 ，英文名： MELK ELISA Kit
人牙周膜組織提取物價格兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISAKit                 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名：  分子式：C8H8OS2 

兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒     6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S 

兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒     6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

兔子S100蛋白(S-100)ELISAKit     6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒              6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。