小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物【Mouse Lung: Normal Artery Fibroblast Derivatives】

小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物是從小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取的，小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞從正常小鼠肺動(dòng)脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

七種腹瀉病毒多重PCR快速檢測(cè)試劑盒TTriptoquinone A14296

腸道病毒71型(EV71)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑TTrimethoprim73甲氧芐啶

札如病毒/腺病毒/星狀病毒三重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒TTrillin141446延齡草苷

諾如病毒GI/諾如病毒GII雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒TTriethyl 773檸檬酸三乙酯

五種致瀉性大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)試劑盒TTricetyl fingolimod1623589
Meclizine hydrochloride  1104-22-9  中文名：鹽酸美克洛嗪  分子式：C25H29Cl3N2    組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  43200-81-3  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2    HumanPlateletassociatedaibody,PA-IgMELISAKit人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

    中文名：佐匹克隆  分子式：C17H17ClN6O3    兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Capecitabine 2',3'-diacetate  162204-20-8  中文名：  分子式：C19H26FN3O8    Human fibronectin (FN) ELISA Kit 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒

2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  161599-46-8  中文名：  分子式：C13H16FN3O6    Humanai-septolysinO,ASOELISAKit 人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
鹽酸多奈哌齊-13C3  Donepezil-13C3 Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱Humanlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit人LFA-3(CD58)規(guī)格：96T/48T

5-O-去甲多奈哌齊  5-O-Desmethyl Donepezil  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSFELISAkit人巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)規(guī)格：96T/48T

二氫多奈哌齊（非對(duì)映）  Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophage-DerivedChemokine，MDCELISAKIT人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC)規(guī)格：96T/48T

Dehydrodeoxy多奈哌齊（多奈哌齊雜質(zhì)）  Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)規(guī)格：96T/48T

脫氧鹽酸多奈哌齊  Deoxy Donepezil Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β，MIP-1βELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)規(guī)格：96T/48T

rac (cis/trans)多奈哌齊N-氧化物  rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3αELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)規(guī)格：96T/48T

6-O-去甲多奈哌齊  6-O-Desmethyl Donepezil  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)規(guī)格：96T/48T

脫氫多奈哌齊（多奈哌齊雜質(zhì)）  Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

多佐胺中間體  Dorzolamide intermediate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)規(guī)格：96T/48T

6‘-羥基多沙唑嗪  6'-Hydroxy Doxazosin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-13—MMP-13ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)規(guī)格：96T/48T
小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物說(shuō)明書大鼠半胱天冬蛋白酶8   英文名稱：   active cysteine-aspaic acid protease-8   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Active Caspase-8  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S 

大鼠半胱天冬蛋白酶7   英文名稱：   active cysteine-aspaic acid protease-7   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Active Caspase-7  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S  度：98.0%

大鼠半胱天冬蛋白酶3   英文名稱：   active cysteine-aspaic acid protease-3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Active Caspase-3  3-Amino-5-phenylpyrazole  1572-10-7  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3 

大鼠白三烯C4elisa試劑盒   大鼠白三烯C4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   大鼠白三烯C4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠白三烯C4試劑盒、大鼠白三烯C4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Trityl candesartan  139481-72-4  中文名：  分子式：C43H34N6O3 

大鼠白三烯B4elisa試劑盒   大鼠白三烯B4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   大鼠白三烯B4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠白三烯B4試劑盒、大鼠白三烯B4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Trityl candesartan  中文名：  分子式：C43H34N6O3