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人體晶狀體組織提取物【Human Lens：Normal Lens Derivatives】

晶狀體位于玻璃體前側(cè)，周圍接睫狀體，呈雙凸透鏡狀。晶狀體為一個(gè)雙凸面透明組織，被懸韌帶固定懸掛在虹膜之后玻璃體之前。晶體是眼球屈光系統(tǒng)的重要組成部分，也是具有調(diào)節(jié)能力的屈光間質(zhì)，其調(diào)節(jié)能力隨著年齡的增長而逐漸降低，形成老視現(xiàn)象。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體晶狀體組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPA

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細(xì)胞培養(yǎng)方法；

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)；

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請后乘以稀釋倍數(shù)。

RealRed核酸染料0μl 5-Hydroxymethyl-furoic acid633815-羥甲基-糠酸

RealSafe核酸凝膠染色劑0μl5-Formyl-furylboronic acid2732

SYBR 核酸染料 μl5-Formamide-(2-formyloxyethl)pyrazole1168568

14.4KD單條蛋白Marker   mg 5-Fluorouracil511

36KD單條蛋白Marker   mg 5-Epilithospermoside847991
D-Tryptophan methyl ester hydrochloride  14907-27-8  中文名：  分子式：C12H15ClN2O2    rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid  6836-22-2  中文名：  分子式：C13H12O3    CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格：48T/96T

Dehydrotolvaptan  137973-76-3  中文名：  分子式：C26H23ClN2O3    細(xì)菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

Tolvaptan  150683-30-0  中文名：托伐普坦  分子式：C26H25ClN2O3    rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Abiraterone acetate  154229-18-2  中文名：乙酸阿比特龍酯  分子式：C26H33NO2    豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL12B ELISA Kit
去噻唑基甲基 利托那韋  Desthiazolylmethyl Ritonavir  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱mouseBeta-EndorphinELISAKit小鼠β-內(nèi)啡肽(Beta-Endorphin)規(guī)格：96T/48T

N-去甲基羅格列酮-d4  N-Desmethyl Rosiglitazone-d4  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseBLC-1/CXCL13ELISAKit小鼠B-細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T

羅格列酮（鉀鹽）  Rosiglitazone (potassium salt)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseBLC-1/CXCL13ELISAKit小鼠B-細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T

羅格列酮鹽酸鹽  rosiglitazone hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseBTCELISAKit小鼠BTCELISAKit規(guī)格：96T/48T

5-羥基羅格列酮  5-Hydroxy Rosiglitazone  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MousecarbonicanhydraseELISAKit小鼠酶(CA)規(guī)格：96T/48T

5-羥基羅格列酮硫酸鹽  5-Hydroxy Rosiglitazone Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MousecardiacoponinIELISAKit小鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)規(guī)格：96T/48T

N-去甲基羅格列酮  N-Desmethyl Rosiglitazone  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseCardiolipinIgAELISAKit小鼠心0脂抗體CardiolipinIgA(ACAIgA)規(guī)格：96T/48T

5-羥基羅格列酮β-D-葡萄糖苷酸  5-Hydroxy Rosiglitazone β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseCardiolipinIgGELISAKit小鼠心0脂抗體CardiolipinIgG(ACAIgG)規(guī)格：96T/48T

磺胺嘧啶  Sulfadiazine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseCardiolipinIgMELISAKit小鼠心0脂抗體CardiolipinIgM(ACAIgM)規(guī)格：96T/48T

N-乙酰基磺胺嘧啶  N-Acetyl Sulfadiazine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Mousecardioophln-1ELISAKit小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)規(guī)格：96T/48T
人體晶狀體組織提取物價(jià)格兔血栓調(diào)節(jié)蛋白(rabbit TM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Chlorotestosterone acetate  中文名：醋酸氯睪酮  分子式：C21H29ClO3  度：98.0%

兔血栓素B2elisa試劑盒   兔血栓素B2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔血栓素B2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔血栓素B2試劑盒、兔血栓素B2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%

兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒     5-Fluorouracil  51-21-8  中文名：  分子式：C4H3FN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔血栓素B2(TXB2)ELISAKit     4-Aminohippuric acid  61-78-9  中文名：4-氨基馬尿酸  分子式：C9H10N2O3 

兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒     5-Fluorouracil  51-21-8  中文名：  分子式：C4H3FN2O2

注意事項(xiàng)；

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。