產品名稱 | 大鼠腦動脈血管內皮細胞提取物培養 | 英文名稱 | Rat Brain : Normal Cerebral Vascular Endothelial Cells Derivatives | 貨號 | EYX99241 |
大鼠腦動脈血管內皮細胞提取物【Rat Brain : Normal Cerebral Vascular Endothelial Cells Derivatives】 大鼠腦動脈血管內皮細胞提取物是從大鼠原代腦動脈血管內皮細胞提取的,大鼠原代腦動脈血管內皮細胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 ![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308a4746a373f0adddc1d0f84d8b517907581032a6d36784940.png)
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30890d5e434ca4166f0ee6a67be83e87fef79a8257d62f82f4f.png) 操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 弓形蟲ELISA檢測試劑盒96Repaglinide13622瑞格列奈 狂犬病抗原膠體金快速檢測試紙條Repaglinide ethyl ester14776 狂犬病病毒ELISA試劑盒(定性)96Rengyol936755連翹環己醇 狂犬病病毒ELISA試劑盒(定量)96Rengynic acid5178838 犬瘟熱抗原膠體金快速檢測試紙條Rebeprazole 11797雷貝拉唑鈉 Human hepatocellular carcinoma aigen (PHC) ELISA Kit 人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒 2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6 Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒 2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate 中文名: 分子式:C11H13F3O5S Human heparin binding epidermal growth factor (HB-EGF) ELISA Kit 人肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒 2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid 91702-98-6 中文名: 分子式:C12H14O3S Human hea fatty acid binding protein (h-FABP) ELISA Kit 人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒 (Z)-Lachnophyllum lactone 81122-95-4 中文名: 分子式:C10H10O2 Human galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 人甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒 2-Amino-5-nitrothiazole 中文名:2-氨基-5-硝基噻唑 分子式:C3H3N3O2S 天麻素 Gastrodin 質量規格:HPLC≥98%,BR 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP-1 ELISA Kit 甜菊苷(標準品) Stevioside 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T 土貝母苷甲(標準品) Tubeimoside I 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP-2 ELISA Kit 土荊皮乙酸(標準品) Pseudolaric Acid B 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAkit 96T/48T 土木香內酯(標準品) Alantolactone 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP-3 ELISA Kit 蛻皮激素(標準品) Ecdysterone 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAkit 96T/48T 脫水穿心蓮內酯(標準品) Dehydroandrographolide 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP-4 ELISA Kit 脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯(標準品) Dehydroandrographolide succinate 質量規格:HPLC≥99%,標準品 小鼠基質細胞衍生因子1(SDF1)ELISA試劑盒 ,英文名: SDF1 ELISA Kit 脫水羊藿素(標準品) Anhydroicaritin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA檢測試劑盒MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 96T/48T 脫氧野尻霉素(標準品) 1-Deoxynojirimycin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 ,英文名: SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit 大鼠腦動脈血管內皮細胞提取物培養人轉化生長因子α(TGF-α)ELISAKit 2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 度:98.0% 關鍵詞: 人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 5751-20-2 中文名: 分子式:C5H6N2OS 人主要組織相容性復合體Ⅱ類elisa試劑盒 人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒 規格型號:96T/48T 人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒、人主要組織相容性復合體Ⅱ類 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 1975-51-5 中文名: 分子式:C8H7NO4 度:98.0% 關鍵詞: 人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒 2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 度:98.0% 人主要組織相容性復合體Ⅰ類elisa試劑盒 人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒 規格型號:96T/48T 人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒、人主要組織相容性復合體Ⅰ類 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 1975-51-5 中文名: 分子式:C8H7NO4 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |