大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物胞【Rat Intestinal: Normal Intestinal Vein Endothelial Cell Derivatives】

大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物胞是從大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的，大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常大鼠腸靜脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

谷胱甘肽還原酶 GR   0U17-Ethylendioxyandrosta,4-dien-one2398317-亞乙二氧基-雄,4-二烯-酮

果膠酶Y3   0mg3β-Acetoxyα-androstan7β-ol03-乙酰基α-雄烷二醇

過氧化氫酶 Catalase   1g 17β-Benzoyloxy-androsta,4-dien-one141617β-苯甲酰氧基-雄甾,4-二烯-酮

還原型谷胱甘肽(GSH)   1g/5g 5α-Androstaneβ,17β-diol575α-雄烷二醇

己糖激酶(HK)   25mg3-O-Methyl-methoxymaxterone92283-O-甲基-甲氧基α-雄烷二醇
Human pulmonary surfacta associated protein B (SP-B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒  2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  161599-46-8  中文名：  分子式：C13H16FN3O6 

Human pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒  2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol  中文名：2,4-雙(α,α-二甲基苯甲基)苯酚  分子式：C24H26O 

Human plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒  1-Amino-4-hydroxyanthraquinone  116-85-8  中文名：1-氨基-4-羥基蒽醌  分子式：C14H9NO3 

Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒  1-Benzyl D-aspartate  中文名：D-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Human plasminogen activator (PLGA) ELISA Kit 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3
通關(guān)藤苷X HPLC≥98% 20mg MouselymphocytefactorELISA試劑盒小鼠細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

卡瓦黃素內(nèi)酯B HPLC≥97% 20mg Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISA試劑盒小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

連翹酯苷I HPLC≥98% 5mg Mouselymphotactin,Lptn/LTNELISA試劑盒小鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

連翹酯苷H HPLC≥98% 5mg MouseLysozyme,LZMELISA試劑盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

連翹酯苷F HPLC≥98% 5mg MouseLysozyme,LZMELISA試劑盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基基苦參醇C HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苦參醇X HPLC≥98% 5mg MouseMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苦參醇W HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苦參醇N HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageInflammatoryProtein1δ,MIP-1δELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苦參醇S HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物胞培養(yǎng)人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒     2-Hydroxyquinoxaline  1196-57-2  中文名：  分子式：C8H6N2O 

人周期素依賴性激酶2elisa試劑盒   人周期素依賴性激酶2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人周期素依賴性激酶2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶2試劑盒、人周期素依賴性激酶2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Hydroxyquinoxaline  中文名：  分子式：C8H6N2O  度：98.0%

人周期素依賴性激酶2(CDK2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CDK2 (Cyclin Depende Kinase 2) ELISA Kit  2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  17241-40-6  中文名：  分子式：C15H10O3 

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒     2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  中文名：  分子式：C15H10O3  度：%

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISAKit     2-Methoxystypandrone  85122-21-0  中文名：  分子式：C14H12O5

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。