人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞【Human Lung: Vein Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) | 人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng) | Human Lung: Vein Smooth Muscle Cells | EYX98748 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。 細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
實(shí)驗(yàn)事項(xiàng): 1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。 6. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。 7. 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。 注意事項(xiàng): 1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。 4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 組胺shēng huà shì jì容量:100克 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 15082-28-72-本基-5(4-聯(lián)本基)-1.3.4-惡二唑2-(4-tert-Butylpxenyl)-5-(4-bipxenyl)-1,3,4-oxadiazole 小鼠卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)免疫試劑盒 Mouse Coiled-coil domain-coaining protein 80,CCDC80 ELISA kit MOPS-SDSBUFFER,20XMOPS-SDS 電泳緩沖液超純級(jí)500MLRT 游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit 2-錄扁桃醋 2-Chloromcndqlic ccid 1041-82-9 LHELISA試劑盒魚促黃體激素規(guī)格:96T/48T wo7iumxy7noXIDEPELLETS,小球蛋白組學(xué)級(jí)1KG1310-73-2RT ELISAKitALP-B小鼠骨特異性堿性酶B規(guī)格:48T/96T 溴紫葡萄糖肉湯25克 藍(lán)色熒光染色體核型分析試劑盒100次 517-23-72-乙酰丁內(nèi)酯2-Acetylbutyrolactone ELISAKitFⅢ人凝血因子Ⅲ規(guī)格:48T/96T 硅藻土載體shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 小鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA試劑盒 ,英文名: FOS ELISA Kit 2,3-丁二同;雙酰;聯(lián)酰基;二基二同;二二酰 2,3-Butcnqdionq;DiMqthyl dikqtonq;2,3-Dikqtobutcnq;Biccqtyl;DiMqthyl glyoxcl 431-03-8 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 96T/48T 叔丁醇shēng huà shì jì容量:0.5毫升 大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)免疫試劑盒 Rat Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit 水合三錄化釕25克 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鈉 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)免疫試劑盒 Mouse proliferating cell nuclear aigen aibody,PCNA ELISA Kit 胃蛋白胨shēng huà shì jì容量:100克 早老素1(PS-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PS-1 ELISA Kit 5,5-二基-1-1啉-N-氧化物;5,5-二基-1-氧化1啉 5,5-DiMqthyl-1-pyrrolinq-N-oxidq;DMPO 3317-61-1 Humanα-enolase,αENOLELISA試劑盒人α烯醇化酶(αENOL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 糖原Ⅸshēng huà shì jì容量:5克 ELISAKitMMP-9小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B規(guī)格:48T/96T 人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)尿苷-5′-三嶙酸三鈉鹽,英文名或英文縮寫:5′-UTP,3Na,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:1000U 人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1(AF1)免疫試劑盒 Human tumor necrosis factor-associated factor 1,AF1 ELISA kit 77-99-62-乙基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇Trimetxylol propane 1脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒 ,英文名: GPC-3 ELISA Kit ALKALINEPHOSPHATASE,2-COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級(jí)COLDsigma RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T α-甲基肉桂醛 α-Methyl-trans-cinnamaldehyde,98% 101-39-3 25G 通用試劑 Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISA試劑盒人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫代乙醇酸鈉/巰基乙酸鈉/Sodium ate AR,80%, 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口 HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T |