產品名稱 | 成人皮膚成纖維細胞取物價格 | 英文名稱 | Human Skin: Normal Dermal Fibroblasts Derivatives | 貨號 | EYX99108 |
成人皮膚成纖維細胞取物【Human Skin: Normal Dermal Fibroblasts Derivatives】 人皮膚成纖維細胞提取物是從人原代皮膚成纖維細胞提取的,人原代皮膚成纖維細胞從正常人皮膚成纖維組織制備。正常成人皮膚成纖維組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 ![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308a4746a373f0adddc1d0f84d8b517907581032a6d36784940.png)
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30890d5e434ca4166f0ee6a67be83e87fef79a8257d62f82f4f.png) 操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 犬細小病毒PCR檢測試劑盒/p-Anisil12262茴香偶酰 犬細小病毒通用型實時熒光PCR檢測試劑盒p-Anisic acid09對茴香酸 犬貓RT-PCR檢測試劑盒/Panaxyne1228559 犬貓實時熒光RT-PCR檢測試劑盒Panaxydiol6396 犬腺病毒PCR檢測試劑盒/Palmitone23棕櫚酮 Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate 中文名: 分子式:C22H19N3O2 度:98.0% 小鼠8異前列腺素elisa試劑盒 小鼠8異前列腺素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠8異前列腺素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠8異前列腺素試劑盒、小鼠8異前列腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-die7,16-d]oxazole-3,20-dione 中文名: 分子式:C23H29NO4 度:98.0% 小鼠8羥基脫氧鳥苷elisa試劑盒 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Deflazacort 中文名:地夫可特 分子式:C25H31NO6 度:98.0% 小鼠6前列腺素elisa試劑盒 小鼠6前列腺素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠6前列腺素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠6前列腺素試劑盒、小鼠6前列腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Cortisone acetate 中文名:醋酸可的松 分子式:C23H30O6 度:98.0% 小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Hydroxyprogesterone 中文名:羥孕酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 小鼠食欲素A(mouse Orexin A) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 鹽酸納曲酮 Naltrexone hydrochloride 質量規格:>99%,BR 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA檢測試劑盒Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 96T/48T 三苯胂氧化物 Triphenylarsine oxide 質量規格:BR 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA檢測試劑盒Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit 96T/48T 5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮(標準品) 5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗環胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA檢測試劑盒Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 96T/48T 蘆薈苷B(標準品) Aloin B 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗肌動蛋白抗體(AAA)ELISA檢測試劑盒Humanai-Actinaibody,AAAELISAKit 96T/48T 牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品) Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 96T/48T 羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品) Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA檢測試劑盒Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 96T/48T 石蕊 Litmus 質量規格:AR 人抗菌肽(Attacin)ELISA檢測試劑盒HumanAttacinELISAKit 96T/48T 7-O-甲基蘆薈新甙A(標準品) 7-O-Methylaloeresin A 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗細胞球蛋白(ALG)ELISA檢測試劑盒Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 96T/48T 肉蓯蓉苷A(標準品) Cistanoside A 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCAELISAKit 96T/48T 蘆薈新甙D(標準品) Aloeresin D 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA檢測試劑盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T 成人皮膚成纖維細胞取物價格α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Rizatriptan benzoate 145202-66-0 中文名:苯甲酸利扎曲坦 分子式:C22H25N5O2 度:98.0% α-淀粉酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 Trehalose 99-20-7 中文名:海藻糖 分子式:C12H22O11 度:98.0% 關鍵詞: α-淀粉酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Propranolol hydrochloride 318-98-9 中文名:鹽酸普萘洛爾 分子式:C16H22ClNO2 度:98.0% 關鍵詞: ypsinInhibitor,Soybean 1g Polyphyllin D 50773-41-6 中文名:重樓皂苷D 分子式:C44H70O16 ypsin1:250,PorcinePancreas 25g Polyphyllin D 中文名:重樓皂苷D 分子式:C44H70O16 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |