小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞提取物【Mouse Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cell Derivatives】

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞提取物是從小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞提取的，小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞從正常小鼠結(jié)腸組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

通用型單重?zé)晒釶CR 檢測試劑盒48Minocycline hydrochloride136148

高致病性H5N1病毒雙重?zé)晒?/span>PCR 檢測試劑盒48Nisoldipine636752尼索地平

H5N2病毒雙重?zé)晒?/span>PCR 檢測試劑盒48Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate17386

H5病毒單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒482-Benzylacrylic acid56699

H7病毒單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Racecadotril8113消旋卡多曲
Methasterone  3381-88-2  中文名：甲基屈他雄酮  分子式：C21H34O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒  

Metamizole   68-89-3  中文名：安乃近  分子式：C13H16N3NaO4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒  

Mesterolone  1424-00-6  中文名：甲氫睪酮  分子式：C20H32O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒           

Mestanolone  521-11-9  中文名：美雄諾龍  分子式：C20H32O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脫氧酚elisa試劑盒   小鼠脫氧酚試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠脫氧酚試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脫氧酚試劑盒、小鼠脫氧酚eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Mequindox  13297-17-1  中文名：乙酰甲喹  分子式：C11H10N2O3  度：98.0%      小鼠粘蛋白elisa試劑盒   小鼠粘蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠粘蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠粘蛋白試劑盒、小鼠粘蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
鹽酸鑭六水(>99%,BR)  Lanthanum (III) chloride, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 動物組織肌質(zhì)網(wǎng)橫小管(TTube)分離試劑盒10

三氧化鉬(>98%,BR)  Molybdic oxide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 動物組織肌質(zhì)網(wǎng)三聯(lián)體(IAD)分離試劑盒10

木瓜蛋白酶懸浮液  Papain 2x crystallized from papaya Latex  質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC 動物組織基因組DNA分離試劑盒50

苯磺酸鈉(>98%，BR)   benzenesulfonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 動物組織鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

過氧化物歧化酶(SOD)  Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)  質(zhì)量規(guī)格：比活度：>5000 U/mg,BC 動物組織膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20

三十烷醇(>98%,植物激素級)  Triacontanol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級 動物組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10

4-羥基(>98.0%，BR)  4-Hydroxybenzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%，BR 動物組織羥脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量檢測試劑盒20

低內(nèi)牛血清白蛋白  Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin  質(zhì)量規(guī)格：>97%,Biotech Grade 動物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測試劑盒20

梭菌蛋白酶  Clostripain  質(zhì)量規(guī)格：酶活：>50U/mg,進(jìn)分 動物組織氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

2'-脫氧鳥苷-5'-一二鈉鹽(分子生物學(xué)級)  dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級 動物組織氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞提取物培養(yǎng)表皮生長因子   英文名稱：   epidermal growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EGF  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名：  分子式：C28H44O3 

便攜式余/總比色計   Poable  / total  colorimeter  4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  中文名：  分子式：C12H15N3O  度：95.0%

便攜式亞鹽比色計   Poable niite colorimeic meter                 4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  中文名：  分子式：C12H15N3O 

便攜式臭氧比色計   Poable ozone colorimeic meter  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  6317-56-2  中文名：  分子式：C13H12OS 

半乳糖凝集素 7 （ Galectin-7 ）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Aspirin  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4  度：99.0%