組成及試劑配制:
1、氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
需要自備的器材：
1．氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。 以下是氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書的訂購信息： 產(chǎn)品名稱 | 編號 | 分類 | 氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書 | EY00P1442 | 核酸檢測試劑盒 |
腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 腎上腺髓質(zhì)素2(ADM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 粘脂蛋白2(MCOLN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 粘脂蛋白3(MCOLN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 粘著斑激酶(FAK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T 粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格： 48T/96T
氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書重組人 Glutaminyl cyclase / QPCT 蛋白 (His 標(biāo)簽)QPCT ProteinHuman 重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)CALR ProteinHuman 重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)CALR ProteinHuman 重組人 CALU / Calumenin 蛋白 (His 標(biāo)簽)CALU ProteinHuman 重組人 NKG2D / CD314 蛋白 (aa 78-216, His 標(biāo)簽)KLRK1 ProteinHuman 重組人 ROBO2 蛋白 (His 標(biāo)簽)ROBO2 ProteinHuman 重組人 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (His 標(biāo)簽)BST2 ProteinHuman 重組人 PNLIP 蛋白 (His 標(biāo)簽)PNLIP ProteinHuman 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)GIF ProteinHuman 重組人 IZUMO1 蛋白 (His 標(biāo)簽)IZUMO1 ProteinHuman 重組人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 (His 標(biāo)簽)C10ORF54 ProteinHuman
反應(yīng)五要素：
氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒說明書參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。 |
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