大鼠前列腺組織提取物【Prostate: Normal Rat Prostate Derivatives】 前列腺是雄性*的性腺器官,位于膀胱與原膈之間。前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠前列腺組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 大鼠前列腺組織提取物培養(yǎng) | 英文名稱 | Prostate: Normal Rat Prostate Derivatives | 貨號 | EYX99457 |
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308a4746a373f0adddc1d0f84d8b517907581032a6d36784940.png)
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30890d5e434ca4166f0ee6a67be83e87fef79a8257d62f82f4f.png) 操作要點; 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 6×TriColor DNA loading buffer(三染料)×1ml3,5-Cycloergosta,8(14),22-triene243521 6-芐氨基嘌呤溶液(6-BA)5×1ml3',5'-Anhydrothymidine7483',5'-脫水胸苷 Acrylamide/Bis 19:1 %PAA Solution0ml3,4-O-Isopropylidene shikimic acid18753 Acrylamide/Bis 29:1 %PAA Solution0ml/0m3,4-Dihydro,4-dihydroxynaphthalen(2H)-one128912 AEBSF ×3,4-Didehydrosapriparaquione1427637 Cerebroside B 88642-46-0 中文名:腦苷酯B 分子式:C41H77NO9 前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Oxododecanedioic acid 30828-09-2 中文名: 分子式:C12H20O5 Human adenovirus IgG (ADV-IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒 Rengynic acid 517883-38-4 中文名: 分子式:C8H14O4 HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Epirengynic acid 1310146-00-9 中文名: 分子式:C8H14O4 HumanDihydrotestosterone,DHTELISA試劑盒人雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 81053-14-7 中文名: 分子式:C9H14O4 組織NADPH細胞色素C還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量檢測試劑盒20次 嗎替麥考酚酯-d4 Mycophenolate Mofetil-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanPlateletFactor4ELISAKit人血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲基麥考酚酯(環(huán)氧樹脂雜質(zhì)E) Methyl Mycophenolate (EP Impurity E) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanPPAR-γELISAKit人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)規(guī)格:96T/48T 嗎替甲基麥考酚酯N-氧基(環(huán)氧樹脂雜質(zhì)G) Mycophenolate Mofetil N-Oxide (EP Impurity G) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱Humanpregnancyassociatedplasmaprotein-AELISAKit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 奈替米星 Netilmicin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanPro-ANP(1-98)ELISAKit人心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格:96T/48T 制霉菌素 Nystatin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanProgesteroneELISAkit人孕激素(Progesterone)規(guī)格:96T/48T 奧氮平內(nèi)酰胺雜質(zhì) Olanzapine Lactam Impurity 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanProinsulinELISAKit人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 奧氮平硫代內(nèi)酰胺雜質(zhì) Olanzapine Thiolactam Impurity 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanPSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)規(guī)格:96T/48T 2-羥甲基奧氮平 2-Hydroxymethyl Olanzapine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanP-SelectinELISAkit人P-Selectin規(guī)格:96T/48T N-去甲基奧氮平 N-Demethyl Olanzapine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱humanPTHELISAKIT人甲狀旁腺激素(PTH)規(guī)格:96T/48T N-氧基奧氮平 Olanzapine N-Oxide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 英文名稱HumanS100BELISAKit人S100B規(guī)格:96T/48T 大鼠前列腺組織提取物培養(yǎng)無內(nèi)質(zhì)粒小量提取試劑盒 50T Androstenedione 中文名:雄烯二酮 分子式:C19H26O2 度:98.0% 無內(nèi)質(zhì)粒大量提取試劑盒 5T Androstenone hydrazone 63015-10-1 中文名:雄酮腙 分子式:C19H30N2O 度:98.0% 無菌甘油 100ml Androstenedione 1963/5/8 中文名:雄烯二酮 分子式:C19H26O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 胃泌素 (Gasin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Aspirin 中文名:阿司匹林 分子式:C9H8O4 胃泌素 英文名稱: Gasin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: G Androstenediol-3-acetate 1639-43-6 中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式:C21H32O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: |