人小腸粘膜上皮細胞提取物【Human Intestinal: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】 人小腸粘膜上皮細胞提取物是從人原代小腸粘膜上皮細胞提取的,人小腸粘膜上皮細胞從正常人小腸粘膜上皮組織制備。正常人小腸粘膜上皮組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 人小腸粘膜上皮細胞提取物說明書 | 英文名稱 | Human Intestinal: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives | 貨號 | EYX98990 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 轉基因植物NPTII單重熒光PCR檢測試劑盒(不含提取)481-Acetyl-piperidinecarboxylic acid251-乙酰基-甲酸 植物基因組DNA提取試劑盒(過柱法)(用于從植物中分離純化高質量植物基因組)(S)-(4-Aminobenzyl)(1H)-oxazolidinone15253(s)-(4-氨基芐基),3-噁唑烷-酮 牛源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(定量)(不含提取)482-Amino-Formylchromone6142462-氨基-甲酰基色原酮 羊源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(定量)(不含提取)482-Aminodiphenylamine5345鄰氨基 鴨源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(定量)(不含提取)48Acid Black 1648酸性黑 1 p-Nitrohydrocinnamic acid 16642-79-8 中文名: 分子式:C9H9NO4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Pitavastatin ethyl ester 167073-19-0 中文名: 分子式:C27H28FNO4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠內皮細胞生長因子D(mouse VEGF-D) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Pitavastatin calcium 147526-32-7 中文名:匹伐他汀鈣 分子式:C50H46CaF2N2O8 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠內皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Pirfenidone 53179-13-8 中文名:哌非尼酮 分子式:C12H11NO 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠內皮細胞生長因子B 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor B 規格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-B Piracetam 7491-74-9 中文名:吡拉西坦 分子式:C6H10N2O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠內皮細胞生長因子C 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor C 規格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-C 紫檀芪(標準品) Pterostilbene 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測試劑盒MouseAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T 紫檀芪,紫檀 Pterostilbene 質量規格:>99%,BR 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 ,英文名: AT ELISA Kit 魚藤酮 Rotenone 質量規格:>90%,BR 小鼠抗增殖細胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒 ,英文名: PCNA ELISA Kit 7-表紫杉醇(標準品) 7-Epitaxol 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測試劑盒Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T 澳洲茄胺;澳州茄胺(標準品) Solasodine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 ,英文名: PCNA ELISA Kit 細辛脂素(標準品) L-Asarinin/ (-)-asarinin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 ,英文名: ACA ELISA Kit 大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標準品) Chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測試劑盒MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T 金合歡素;刺槐素(標準品) Acacetin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒 ,英文名: pANCA ELISA Kit 氯化木蘭花堿(標準品) Escholine chloride 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T 蒲公英甾醇乙酸酯(標準品) taraxasteryl acetate 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ,英文名: EMAb ELISA Kit 人小腸粘膜上皮細胞提取物說明書Senkyunolide C 91652-78-7 中文名:洋川芎內酯C 分子式:C12H12O3 Humanplacealprotein,PPELISAKit人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒規格:96T/48T Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Pilosol A 501086-15-3 中文名: 分子式:C13H12O Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 Glycerol 56-81-5 中文名:甘油 分子式:C3H8O3 HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Riligustilide 89354-45-0 中文名: 分子式:C24H28O4 Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規格:96T/48T |