人腦膜成纖維細(xì)胞【Human Brain: Normal Brain Meningeal Fibroblasts】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

月桂基基錄化，英文名或英文縮寫：DTAC，級(jí)別：高純，60%，規(guī)格：25克  CLIAKitforAZT(MouseAzidothymidine)ELISAKit小鼠疊氮胸苷規(guī)格：48T/96T

EE肉湯NA  線蟲同步化生長(zhǎng)培養(yǎng)試劑盒10次

Benzethoniumchloride海胺16221公斤試劑級(jí)  RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1，2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3  豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 ，英文名： EGF ELISA Kit

鉬 MolybdqnuM 7439-98-7  One tea phenol amine (CA) ELISA Kit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒
戊脈安，英文名或英文縮寫：(±)-Verapamil xy7nochloride，級(jí)別：超純，80%，液體，規(guī)格：10毫克  Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

固黃0NA  小鼠γ基(GABA)ELISA試劑盒 ，英文名： GABA ELISA Kit

S-本基，英文名或英文縮寫：L-Homopxenylalanine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1克  大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA檢測(cè)試劑盒RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 96T/48T

膽紅素氧化酶 Bilirubin oxidase (15-65 units/mg) 80619-01-8 50UN 通用試劑  人P選擇素(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒 Human P-Selectin ELISA kit

已醋醋-順式-3-己烯酯 ≥98% FqMc 3403 31201-11-8  英文名稱MouseIgEELISAKit小鼠免疫球蛋白E(IgE)規(guī)格：96T/48T
三錄新，英文名或英文縮寫：Triclosan，級(jí)別：USP級(jí)，750mcg/mg，規(guī)格：100克  Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(L-乳酸脫氫酶)  Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISA試劑盒人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

FastredBsalt1,5-disulfonate2-甲氧基-4-硝基-本重氮1,5-奈二磺酸鹽25克ACS，95%  組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

一溴二錄烷 BROMODICHLOROMqTHcNq 1972/7/4  HumanLegionellapneumophilaaigen，LPAgELISAKit人軍團(tuán)菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

臺(tái)盼藍(lán) Trypan Blue (Dye content, ≥60%) 72-57-1 5G 染色劑  人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腦膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)麥芽糖酶，英文名或英文縮寫：γ-MDH，級(jí)別：BR，20u/ul，規(guī)格：1克  豬胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫試劑盒 Pig Cystatin-C,CST3 ELISA kit

62852-91-9姆沙伯 105CHROMOSORB(R) 105  HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

3-基，英文名或英文縮寫：β-Alanine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：10克  HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

堿性紅1:1 Basic Red 1:1,90% 3068-39-1 25G 吸附樹脂  組織總氨基酸含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

FTA純化 FTc Purificction Rqcgqnt  HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit人游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。