大鼠淋巴組織提取物【Lymph: Normal Rat Lymphatic Derivatives】

淋巴組織，又稱免疫組織，是以網(wǎng)狀組織為基礎(chǔ)，網(wǎng)孔中充滿大量的淋巴細胞和一些巨噬細胞、漿細胞等。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠淋巴組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

Acridine Orange 丫啶橙   1g/ 5g2-Amino-chloro,4-naphthoquinone279712-氨基-氯,4-萘醌

ADA   25g2-Amino-benzyloxypyridine21632-氨基-芐氧基吡啶

Adenine 腺嘌呤   g2-Amino,5-dibromobenzaldehyde95

Adenosine 腺苷；腺嘌呤核苷   5g2-Amino'-nitrodiphenyl sulfide1928412-氨基'-硝基二苯基硫醚

ADP   0mg/2mg/0mg2-Amino'-chloro-nitro benzophenone1162-氨基-硝基'-氯二苯甲酮
Cilnidipine  132203-70-4  中文名：西尼地平  分子式：C27H28N2O7    人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit              

Gefitinib  184475-35-2  中文名：吉非替尼  分子式：C22H24ClFN4O3    人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒  

Erlotinib  183321-74-6  中文名：埃羅替尼  分子式：C22H23N3O4    人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒  

2-Flurbiprofen  51543-40-9  中文名：氟比洛芬  分子式：C15H13FO2    人脂蛋白a（Lp-a）ELISA試劑盒  

2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-41-0  中文名：  分子式：C10H14N2O6S3    人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒
美西林/氮脒青霉素  Mecillinam  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測試劑盒Rathepaticlipase,HLELISAKit 96T/48T

甲羥孕酮/安宮黃體素  Medroxyprogesterone   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測試劑盒Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit 96T/48T

甲羥孕酮(標準品)  Medroxyprogesterone   質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T

甲巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-甲基咪唑  Methimazole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP 32 大鼠高敏*狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 96T/48T

甲巰咪唑(標準品)  Methimazole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T

美索巴莫  Methocarbamol  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP 32 大鼠睪酮(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,TELISAKit 96T/48T

美索巴莫（標準品）  Methocarbamol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 大鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA檢測試劑盒RatLebtospiraIgGELISAKit 96T/48T

甲基潑尼松龍  Methylprednisolone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 96T/48T

甲基潑尼松龍（標準品）  Methylprednisolone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97.5%,標準品 大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T

鹽酸美西律（慢心率）  Mexiletine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 96T/48T
大鼠淋巴組織提取物豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒     Amlodipine  88150-42-9  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5 

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit                 Amlodipine  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5 

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物elisa試劑盒   豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒、豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Amisulpride  中文名：阿米舒必利  分子式：C17H27N3O4S  度：98.0%

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒     Amlexanox ethyl ester  中文名：  分子式：C18H18N2O4  度：98.0%

豚鼠特異性球蛋白E（sIgE）ELISA試劑盒              Amlexanox ethyl ester  中文名：  分子式：C18H18N2O4

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。