小鼠內臟脂肪細胞提取物【Mouse Fat: Normal Visceral Fat Cells Derivatives】

小鼠內臟脂肪細胞提取物是從小鼠原代內臟脂肪細胞提取的，小鼠原代內臟脂肪細胞從正常小鼠脂肪組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

膠原酶I   0mg3-Ethoxyandrosta,5-dien7-one97263-乙氧基-雄甾,5-二烯7-酮

膠原酶II   0mg9-Dehydroandrostenedione3599-去氫雄烯二酮

膠原酶IV   0mg5-Androstenβ-ol7-one ethyleneketal774

膠原酶V   0mg3-Amino-phenylpyrazole1573-氨基-苯基吡唑

焦磷酸鈉   0g3-Amino-phenyl-propa459343-氨基-苯基-丙醇
humanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒規格：96T/48T  (R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol  18531-94-7  中文名：(R)-(+)-1,1'-聯-2-萘酚  分子式：C20H14O2 

Humanparaoxonase,PONELISAKit人酶(PON)ELISA試劑盒規格：96T/48T  (1S,2S)-1-Amino-2-Indanol  中文名：(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO 

HumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit人腮腺炎病毒IgMELISA試劑盒規格：96T/48T  (1S,2R)-2-Ami,2-diphenylethanol  23364-44-5  中文名：(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO 

HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺炎病毒IgGELISA試劑盒規格：96T/48T  (1S)-4,5-Dimethoxy-1-[(methylamino)methyl]benzocyclobutane hydrochloride  中文名：  分子式：C12H18ClNO2 

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit人對(PABA)ELISA試劑盒規格：96T/48T  (1R,2S)-2-Ami,2-diphenylethanol  23190-16-1  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO
無水二氫鈉（標準品）   Dihydrogen Phosphate Anhydrous  質量規格：供檢查用 小鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 ，英文名： SDH ELISA Kit

長春西汀（標準品）  Vinpocetine  質量規格：含量測定 小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 ，英文名： ENA-78/CXCL5 ELISA Kit

枸櫞酸鉍雷尼替丁（標準品）  Ranitidine bismuth   質量規格：供檢查用 小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： OMgp-Ab ELISA Kit

丹曲林鈉（標準品）  Dantrolene  hemiheptahydrate  質量規格：含量測定 小鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T

呱西替柳（標準品）  Guacetisal  質量規格：含量測定 小鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 ，英文名： GFAP ELISA Kit

鹽酸黃酮哌酯（標準品）  Flavoxate hydrochloride  質量規格：含量測定 小鼠神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 ，英文名： fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit

3-甲基黃酮-8-羧酸（標準品）  3-Methylflavone-8-carboxylic acid  質量規格：供檢查用 小鼠神經生長導向因子Slit2ELISA檢測試劑盒MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 96T/48T

鹽酸番茄堿（標準品）  Tomatidine hydrochloride  質量規格：HPLC≥98%,標準品 小鼠神經生長因子(NGF)ELISA檢測試劑盒MouseNervegrowthfactor,NGFELISAkit 96T/48T

鹽酸頭孢唑蘭  Cefozopran hydrochloride  質量規格：>97%,BR 小鼠神經生長因子(NGF)ELISA試劑盒 ，英文名： NGF ELISA Kit

阿嗪米特（標準品）  Azintamide  質量規格：含量測定 小鼠神經生長因子前體(proNGF)ELISA試劑盒 ，英文名： proNGF ELISA Kit
小鼠內臟脂肪細胞提取物人P27蛋白elisa試劑盒   人P27蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   人P27蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人P27蛋白試劑盒、人P27蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Schleicheol 1  256445-66-6  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  關鍵詞：  抗癌; 久樹; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

人H-rasELISAKit                 3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8 

人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯吸附測定試劑盒   Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit                  3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one  中文名：  分子式：C10H10O3 

人Dickkopf1elisa試劑盒   人Dickkopf 1試劑盒   規格型號：96T/48T   人Dickkopf 1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人Dickkopf 1試劑盒、人Dickkopf 1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3  度：98.0%  關鍵詞： 

人chemerinelisa試劑盒   人chemerin試劑盒   規格型號：96T/48T   人chemerin試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人chemerin試劑盒、人chemerin elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Triethyl   77-93-0  中文名：檸檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7  度：98.0%  關鍵詞：  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫