人腦動脈血管平滑肌細胞提取物【Human Brain: Normal Cerebral Artery Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives】 人腦動脈血管平滑肌細胞提取物是從人原代腦動脈血管平滑肌細胞提取的,人原代腦動脈血管平滑肌細胞從正常人腦動脈血管平滑肌組織制備。正常人腦動脈血管平滑肌組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 人腦動脈血管平滑肌細胞提取物 | 英文名稱 | Human Brain: Normal Cerebral Artery Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives | 貨號 | EYX99079 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 手足口CA6單重熒光PCR檢測試劑盒48Dicyclanil1126363地昔尼爾 手足口CA單重熒光PCR檢測試劑盒48Iloperidone1334547伊潘立酮 乙腦病毒單重熒光PCR檢測試劑盒484-[(4-Methylpiperazin-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride62619甲磺酸伊馬替尼 腮腺炎病毒單重熒光PCR檢測試劑盒484-(4-Aminophenyl)morpholin-one43569 單純皰疹病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide1615967 N4-Benzoylcytidine 中文名:N4-苯甲酰胞苷 分子式:C16H17N3O6 度:98.0% 小鼠補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒 3-Benzoylthiazolidine-2-thione 中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮 分子式:C10H9NOS2 度:98.0% 小鼠補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 Betamethasone 中文名:倍他米松 分子式:C22H29FO5 度:98.0% 小鼠補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒 (S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 中文名:(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮 分子式:C13H15NO3 度:98.0% 小鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 5-Benzyl D-glutamate 中文名:D-谷氨酸5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0% 小鼠補體成分5 英文名稱: Mouse Compleme Compone 5 規格: 48T/96T 英文縮寫: C5 胰蛋白酶1:2500 Trypsin 1:2500 from Porcine pancreas 質量規格:>2500U/MG 人單胺氧化酶(MAO)試劑盒 Human monoamine oxidase,MAO ELISA Kit 阿利苯多 Alibendol 質量規格:>98%,BR 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgG)ELISA kit 核糖核酸酶A(美侖);RNase A;核糖核酸酶I Ribonuclease A from bovine pancreas 質量規格:≥50 U/mg,美侖 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgM)ELISA kit 5‘-吡哆醛,一水 Pyridoxal 5-phosphate 質量規格:>98%,BR 人單皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgG)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ(HSVⅠ)aibody(IgG)ELISA Kit NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏) Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH) 質量規格:>95%,羅氏進分 人單皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ(HSVⅠ)aibody(IgM)ELISA kit NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖) Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH) 質量規格:>97%,國產美侖 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體IgG(HSVⅡ-Ab)試劑盒 Human Herpes simplexvirus Ⅱ IgG aibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit 葡萄糖氧化酶 Glucose oxidase 質量規格:BR,>200U/mg 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)試劑盒 Human Herpes simplexvirus Ⅱ IgM aibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit 溶菌酶(蛋清) Lysozyme,from egg white 質量規格:2萬U/mg,分子生物學級 人單皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)試劑盒 Human Herpes simplex virus,HSV-Ag1 ELISA Kit HRP;辣根過氧化物酶 Peroxidase, Horseradish(HRP) 質量規格:BR,RZ>2.5,活性>250U/mg 人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 Human MCP-1 ELISA kit 透明質酸酶 Hyaluronidase 質量規格:≥500IU/mg,BR,牛源提取 人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒 Human MCP-2 ELISA kit 人腦動脈血管平滑肌細胞提取物Trillin 14144-06-0 中文名:延齡草苷 分子式:C33H52O8 度:99.0% 關鍵詞: 血小板聚集抑制劑; 吉林延齡草; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit Triethyl 77-93-0 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 度:98.0% 關鍵詞: 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit Tricetyl fingolimod 162358-09-0 中文名: 分子式:C25H39NO5 度:98.0% 關鍵詞: 中文名稱 方法 規格 Triamcinolone acetonide 76-25-5 中文名:曲安奈德 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠孕激素/孕(PROG)ELISAKit Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISAKit |